Поучаствовал в крутом проекте по методике
Mar. 3rd, 2018 04:16 pmRawadee Kumlert, Kittipong Chaisiri, Tippawan Anantatat, Alexandr A. Stekolnikov, Serge Morand, Anchana Prasartvit, Benjamin L. Makepeace, Sungsit Sungvornyothin, Daniel H. Paris.
March 1, 2018.
Autofluorescence microscopy for paired-matched morphological and molecular identification of individual chigger mites (Acari: Trombiculidae), the vectors of scrub typhus
PLoS ONE 13(3):e0193163
DOI: 10.1371/journal.pone.0193163 (открытый доступ)
Коротко говоря, вечная проблема с молекулярными исследованиями клещей-краснотелок состояла в том, что практически никогда нельзя было уверенно сопоставить полученные молекулярные данные с тем или иным морфологическим видом, поскольку клещ маленький (меньше миллиметра) и очень непрочный: после выдавливания всех внутренностей на молекулярку, остается только сильно поврежденная шкурка. При этом на одном зверьке часто паразитирует одновременно несколько родов и видов клещей, так что не получится часть взять для секвенирования, а часть отпрепарировать для морфологического исследования.
У неотпрепарированного клеща практически никакие морфологические признаки не видны, но если мы возьмем флуоресцентный микроскоп, то на временном препарате в обычном спирте получим вот такую картинку:

Отлично видно и расположение спинных щетинок, и спинной щит - можно сделать промеры, необходимые для определения, а потом растолочь всего клеща для секвенирования.
Аккуратный тайский постдок Равади (первый автор) сделала даже прижизненные фотографии каждого клеща, как он сидит на ухе у грызуна перед тем, как его извлекут оттуда и зафиксируют в спирте: по ссылке можно увидеть всю эту красоту.
March 1, 2018.
Autofluorescence microscopy for paired-matched morphological and molecular identification of individual chigger mites (Acari: Trombiculidae), the vectors of scrub typhus
PLoS ONE 13(3):e0193163
DOI: 10.1371/journal.pone.0193163 (открытый доступ)
Коротко говоря, вечная проблема с молекулярными исследованиями клещей-краснотелок состояла в том, что практически никогда нельзя было уверенно сопоставить полученные молекулярные данные с тем или иным морфологическим видом, поскольку клещ маленький (меньше миллиметра) и очень непрочный: после выдавливания всех внутренностей на молекулярку, остается только сильно поврежденная шкурка. При этом на одном зверьке часто паразитирует одновременно несколько родов и видов клещей, так что не получится часть взять для секвенирования, а часть отпрепарировать для морфологического исследования.
У неотпрепарированного клеща практически никакие морфологические признаки не видны, но если мы возьмем флуоресцентный микроскоп, то на временном препарате в обычном спирте получим вот такую картинку:

Отлично видно и расположение спинных щетинок, и спинной щит - можно сделать промеры, необходимые для определения, а потом растолочь всего клеща для секвенирования.
Аккуратный тайский постдок Равади (первый автор) сделала даже прижизненные фотографии каждого клеща, как он сидит на ухе у грызуна перед тем, как его извлекут оттуда и зафиксируют в спирте: по ссылке можно увидеть всю эту красоту.